在一个风雨交加电闪雷鸣的夜晚，一个黑衣蒙面人手持宝剑，利用高大树冠的枝脉潜入侵华日军第十八师团司令部，她向师团长古野康弘的办公室摸去。这个黑衣蒙面人其实是个年轻貌美的姑娘，她叫岚么。岚么在新婚之日便遭到毁灭性的打击。日寇的飞机炸毁了她的家园，她的父母和新婚丈夫以及许多亲人均葬身于日寇飞机的轰炸之中。岚么就是带着这血海深仇前来寻找古野康弘的，她要用仇人的血来祭奠死难的亲人。
岚么摸到办公室的门口，看到古野康弘正在作画。仇人相见份外眼红，岚么抽出软剑便扑向古野康弘。古野康弘也并非等闲之辈，他也是日本剑术的九段高手。古野康弘闪过岚么致命一击，抄起武士刀便与岚么搏杀起来。打斗异常激烈，岚么也负了伤。但是岚么并不畏惧，她连连向古野康弘发动攻击，打的古野康弘只有招架之功即无还手之力。
雨幕中，一队全副武装的士兵向十八师团司令部潜行。这是国军特种兵"黑虎"队，他们在队长林涛和副官方志洋的率领下准备端掉日寇十八师团司令部。
岚么与古野的打斗惊动了日兵守备部队，他们冲进了办公室。岚么不能杀掉古野便越窗逃去。古野侥幸捡回了一条性命。
负伤的岚么在树林中奔跑，身后一群日兵紧追不舍。林涛和方志洋见这个姑娘己经惊动日兵，自己的计划不能实施，便率队悄然撤离。
黑玫瑰之铁血女骑兵剧照
日兵们终于追上并包围了岚么，日军官命令岚么放下武器举手投降，岚么宁死不从，她把利剑架在了自己的脖子上准备杀身成仁。就在这千钧一发之际，从树林中猛然奔出一匹白色的骏马。骏马上骑着一个英武的男青年，只见他纵马驰骋挥舞钢刀杀入敌阵。日兵们顿时乱了套，男青年乘机将岚么拉上马背，他向日兵投出两颗手雷，在剧烈的爆炸中，白马冲出日兵的包围圈。
在山洞里，岚么醒来。她看到了那个男青年，心里不由一阵紧张。那个男青年见状笑了起来，他摘下帽子，流出瀑布似的秀发，原来她也是个姑娘。这个姑娘名叫印碧霞。印碧霞的全家也都是被日寇所残杀，她也是怀着满腔仇恨踏上的复仇之路。两人共同的命运将她们紧紧联在一起。
岚么决心搞到武器武装自己，印碧霞带她去了日寇的"慰安所"，准备在那里把需要的武器搞到手。
半夜时分，岚么和印碧霞潜入了"慰安所"，就在她俩要下手之际，日兵们突然闯了进来，原来他们在扫荡中又抓来两个姑娘。日兵们要对这两个姑娘实施非礼。岚么和印碧霞再也忍不住了，她俩挥刀扑向日兵杀了起来。日兵被消灭，她俩救出了这两个姑娘：洛勇和青风。
古野康弘的妹妹古野江川是日寇十八师团特别行动队队长，她酷爱马术，精通劈杀。她曾用抓来的中国战俘练习骑马杀人，双手沾满了鲜血。江川看到负伤的哥哥，决心抓住这个女剌客为哥哥报仇。
林涛回去后对那个中国姑娘念念不忘，他为自己没有挺身相救而悔恨万分。这时副官方志洋送来紧急命令，上峰再次催促"黑虎"务必捣毁日寇的指挥部。
岚么、印碧霞和洛勇、青风义结金兰，她们冲天发誓：一定要与日本鬼子血战到底，为死难的家人报仇。
"慰安所"被袭击，十多个皇军士兵被杀，极大地震撼了古野康弘和江川，他们命令汉奸队队长侯德标和队副刘三无论无如也要找出杀死日军士兵的人。
我中共龙潞游击队在队长铁峰的率领下四处打击日寇，这天他们又在青山沟伏击了日军的一个小队，三十多日兵被击毙，游击队大获全胜。
游击队的胜利不但严重地打击了日寇嚣张气焰，也给广大人民极大的鼓舞，岚么四姐妹决心以游击队为榜样杀敌报国。她们决定给自己起个响亮的名字，以此向世人宣示她们杀敌报国的决心。岚么从一张报纸上得到启发，她决定用"黑玫瑰"抗日的精神来武装自己。于是她们就沿用了"黑玫瑰"这个令日寇闻风丧胆的名号。
古野为了舒发心中的怒气，他公开枪杀二十个国军士兵战俘。这令林涛义愤填膺，他决心一定为死难的弟兄报仇雪恨。
青风病了，再加上她们断了粮，岚么她们艰难度日。印碧霞看在眼里急在心上，她决定自己下山搞粮食。岚么原本不同意，但又看到眼前的情形，她只好点了头。
林涛接到暗线情报：古野康弘明天要去五号基地视察并在那里过夜。机不可失，失不再来，林涛决定带领"黑虎"夜袭五号基地。
岂料，"古野视察五号基地"是一个假情报，它的作甬始者正是那个古野江川。她是利用林涛报仇心切，于是和潜入在我们内部的日谍"海豚"共同炮制了这个诱饵，他们想挖好了陷阱专等林涛与"黑虎"往里跳。
林涛并不知这是江川阴险的诡计，他按计划带队准时出发了。"黑虎"的行动出奇的顺利，林涛他们没费多大气力便潜进了五号基地。五号基地内静的瘆人，林涛突感不妙，正当他要下撤退命令之际，江川指挥大批埋伏的日兵杀出。一阵枪淋弹雨，"黑虎"队员倒下一片。林涛见中了鬼子埋伏，他率仅存的人员进行殊死搏斗。但在剧烈的爆炸中，林涛和方志洋中弹倒地，他俩不幸被俘。
印碧霞在取粮的途中，正好与押着被俘林涛的日兵相遇，印碧霞不但看到了林涛，更看到了杀父仇人古野江川。
岚么为印碧霞的不归坐卧不安，洛勇跑来告诉她：青风不见了。岚么和洛勇急忙去找。原来病中的青风听到姐姐们的谈话，她决心不再拖累姐姐们而擅自出走。
青风在森林中艰难前行，几个搜山的日兵正向她靠近……
行走中的青风猛然发现前面的日兵，她想躲己经来不及了，于是她抄枪便跟日兵打了起来。很快青风弹尽粮绝被日兵包围。就在这千钧一发之际，岚么和洛勇赶到，她们打死日兵救出青风。
岚么怒骂了青风，说出了"无论什么时候，我们四姐妹一个都不能少!"这令洛勇和青风感动万分。
印碧霞回来了，她不但带回了粮食，还带回一个日本鬼子要成立"治安维持会"的情报。岚么被这个情报深深吸引，她觉得这是一个杀敌夺枪同时又能为"黑玫瑰"扬名的绝佳时机。于是她决定带领妹妹们化装进城进行实地侦察。这个决定博得妹妹们的一致同意。
江川由于消灭国民党"黑虎"有功，被授予象征帝国最高荣誉的旭日白勋章。大介总司令还告诉她：军部做为奖励特地从日本国内运来了十五匹纯种东洋军马。这令江川兴奋不己。大介还警告古野康弘：如果你再无起色，你们古野家族的荣誉就会被女孩子继承了。现在的当务之急是务必把"治安维持会"的事情办好。
古野接到命令不敢怠慢，他急召侯德标和刘三，把召开"治安维持会"的保卫工作交给了他们。古野再三叮嘱：一定要把"治安维持会"开的风风光光热热闹闹，最好找几个能歌善舞的姑娘前来助兴。侯德标和刘三接到指命，借机大肆搜刮民脂民膏终饱私囊引起极大民愤。
游击队长铁峰也收到日寇要成立"治安维持会"的情报，他决定无论如何也要粉碎日寇的这一阴谋。他带领一班长大鹏也化装进城侦察，摸清了"治安维持会"召开的地点在杨家祠堂。
岚么四姐妹来到傈僳族头人阿嘎旺的家，阿嘎旺热情地接待了她们。阿嘎旺亲自带她们去祠堂侦察。日寇在祠堂的门口布下了重兵，为了搞清里面的情况，青风与阿嘎旺演出一场打架的戏，青风冒险钻了进去，不料正碰上侯德标与刘三，侯德标见青风年轻漂亮，便命令刘三把青风被抓走。
原来侯德标正苦于"治安维持会"找不到能歌善舞的姑娘而头痛呢，青风的出现无疑于正中他的下怀。
岚么当即决定：我们姐妹去!
